Ức chế IPZ490 và NFAT-GFP Gen ipz490 mã hóa protein XNXX, một thành phần của con đường vận chuyển từ ER đến Golgi. Protein ER-to-Golgi vận chuyển mRNA từ tế bào chất đến nhân thông qua tương tác của nó với các yếu tố vận chuyển hạt nhân, chẳng hạn như SNX và TRAP. XNXX cũng tham gia vào việc điều chỉnh sự kéo dài của các vi ống sợi trục, một quá trình cần thiết cho sự di chuyển của các mRNA và protein dọc theo sợi trục và để tái tạo dây thần kinh sau chấn thương. Nghiên cứu của chúng tôi cho thấy rằng việc ức chế vận chuyển hạt nhân bằng IPZ ngăn chặn làn sóng thay đổi phiên mã thứ hai liên quan đến quá trình điều hòa lại sợi trục do RIS gây ra đối với các mRNA, bao gồm cả các mRNA đặc hiệu của sợi trục và điều hòa giảm mRNA b-actin ở các sợi trục hồi hải mã bị thương. Điều này được biểu thị bằng việc giảm đáng kể mức độ mRNA cho cả các bản phiên mã liên quan đến RIS và không liên quan, được đo bằng RT-PCR thời gian thực (các thanh màu trắng trong Hình 6; các thanh màu xám biểu thị dữ liệu được thay thế từ Hình 2, 24 giờ). Khả năng sống của tế bào được đánh giá bằng cách sử dụng xét nghiệm sống/chết sau khi truyền, xử lý IPZ và cảm ứng ionomycin. Thử nghiệm này cho thấy không có độc tính hoặc mất khả năng sống sót trong cả mẫu đối chứng hoặc mẫu được xử lý IPZ, xác nhận rằng tác động của các phương pháp điều trị này không phải do các tế bào không phải tế bào thần kinh gây ra. Cuối cùng, chúng tôi đã xác định liệu việc xử lý IPZ có ảnh hưởng đến sự tích lũy hạt nhân của NFAT-GFP trong tế bào thần kinh hay không bằng cách xử lý các mẫu cấy bằng ionomycin hoặc IPZ và sau đó đánh giá quá trình định vị của NFAT-GFP bằng kháng thể chống NFAT-GFP (màu xanh lá cây) hoặc chất đánh dấu tế bào thần kinh, SMI-31 (đỏ). Tín hiệu NFAT-GFP bị giảm trong các tế bào chưa tiếp xúc với IPZ, trong khi tín hiệu này tăng lên trong các sợi trục cùng bên đã được xử lý bằng ionomycin hoặc IPZ.